SDS PAGE vs electroforeza gelului
Electroforeza poate fi utilizată pentru a determina masa unui obiect, de obicei, pentru proteine și acidul dezoxiribonucleic (ADN). Lanțul ADN-ului, atunci când este introdus în substanțe chimice, poate accelera sau încetini procesul de informare. Marcatorii ADN de masă cunoscută sunt utilizați pentru a aproxima dimensiunea obiectelor care circulă odată ce se termină electroforeza. Electroforeza este cel mai probabil instrumentul cel mai utilizat pentru biologi și biochimisti moleculari.
Există două tipuri de electroforeză care sunt utilizate în mod obișnuit în acest proces. Acestea sunt electroforeza pe gel de dodecil sulfat de poliacrilamidă de sodiu (SDS-PAGE) și electroforeza pe gel nativă.
SDS-PAGE este o metodă neselectivă de electroforeză în gel, utilizată în domenii precum: biochimie, criminalistică, biologie și genetică pentru a detașa proteina de mobilitatea electrophoretică. SDS este un surfactant anionic care poate fi utilizat pentru a ajuta la lizarea celulelor în timpul extracției ADN și pentru separarea proteinelor în SDS-PAGE. În timpul electroforezei, un amestec de proteine este mai întâi lichefiat într-o soluție de SDS. Apoi se aplică o substanță numită Mercaptoetanol pentru a îndepărta legăturile disulfidice pentru a face proteina liniară. Se inițiază apoi electroforeza. Rezultatele ar produce două resturi de molecule, dintre care unul este SDS-PAGE.
Absența SDS-PAGE nu este o problemă, deoarece electroforeza gelului poate fi făcută numai că proteinele nu își pierd toată structura secundară și terțiară și nu se deschid în bare în general drepte.
Între timp, electroforeza gelului nativ utilizează gelul ca mediu anticonvectiv. Se utilizează de obicei pentru separarea macromoleculelor biologice cum ar fi ADN, acidul ribonucleic (ARN) și proteina. Poate fi folosit și pentru separarea nanoparticulelor.
Există două geluri principale utilizate în electroforeza gelului nativ, și anume:
Gel agaroz care este utilizat pentru molecule mai mari. Acest gel nu identifică diferențe mici între două benzi moleculare. Este, de asemenea, utilizat exclusiv pentru separarea ADN-ului. Vizualizarea gelului de agaroză se face cu amestecul de bromură de etidiu.
Gel de poliacrilamidă utilizat pentru molecule mai mici. Acest gel identifică diferențele dintre benzile moleculare. În afară de ADN, poate separa și proteinele.
Rezumat:
1.SDS-PAGE este o metodă neselectivă de electroforeză în gel, utilizată în domenii precum: biochimie, medicină legală, biologie și genetică pentru a detașa proteina de mobilitatea electrophoretică, în timp ce electroforeza în gel este folosită de obicei pentru separarea macromoleculelor biologice cum ar fi ADN, acidul ribonucleic (ARN) și proteina. Poate fi folosit și pentru separarea nanoparticulelor.
2. Electroforeza gelului nativ are două tipuri, și anume: gelul de agaroză și gelul de poliacrilamidă.