Electroforeza vs Electroosmoza
Metodele de separare fizică, cum ar fi filtrarea, distilarea, cromatografia pe coloană nu sunt metode ușoare atunci când se ajunge la separarea unor molecule. Electroforeza și electro-osmoza sunt două alte tehnici de separare care pot fi utilizate pentru a separa particulele încărcate.
Ce este electroforeza?
Electroforeza este o tehnică de separare a moleculelor pe baza dimensiunilor acestora. Fundamental pentru această separare este sarcina moleculei și capacitatea ei de a se deplasa într-un câmp electric. Aceasta este tehnica cea mai frecventă și principală în biologia moleculară de a separa moleculele, în special ADN-ul și proteinele. Acest lucru este în mare parte în uz, deoarece este relativ ușor și ieftin. Aparatul pentru electroforeză poate fi puțin complicat și pregătirea acestuia durează ceva timp. Dar putem face cu ușurință un aparat de electroforeză din lucrurile pe care le avem în laborator. Tehnicile de electroforeză pot varia în funcție de scopurile noastre. Putem folosi electroforeza unidimensională pentru separarea ADN-ului sau proteinei. Electroforeza cu două dimensiuni este utilizată atunci când sunt necesare mai multe eșantioane rezolvate (ca în cazul imprimării cu degetul). Un gel este utilizat ca mediu de susținere pentru a separa moleculele. Acest gel poate fi preparat ca foi plate sau în tuburi. Baza acestei proceduri este de a separa moleculele în funcție de viteza lor de mișcare printr-un gel atunci când este furnizat un câmp electric. Molecule negativ încărcate ca ADN-ul tind să se deplaseze spre polul pozitiv din acest câmp electric, în timp ce moleculele încărcate pozitiv tind să se deplaseze la polul negativ. Două tipuri de geluri sunt utilizate în electroforeză ca agaroză și poliacrilamidă. Aceste două puteri de rezolvare diferite. Gelul acționează ca o sită pentru filtrarea diferitelor dimensiuni ale moleculelor. Încărcările electrostatice instalate în gel acționează ca forță.
Separarea depinde de mobilitatea ionilor.
F = fv = zee
V = ZeE / f
F = forța care acționează asupra unei particule
f = coeficientul de frecare
V = viteza medie de migrare
Z = sarcina particulei migratoare
e = încărcare elementară
E = rezistența câmpului electric
Condițiile necesare pentru electroforeză sunt relativ simple. Când se face gelul și se rulează eșantionul, se folosește un tampon. Marcherele și coloranții sunt utilizați în scopuri de vizualizare.
Ce este electro-osmoza?
Acesta este procesul de deplasare a unui lichid printr-un material folosind un câmp electric aplicat. Mișcarea poate fi prin intermediul unui material poros, de-a lungul capilarului, membranei etc. Aceasta poate fi utilizată ca tehnică de separare (în special electro-osmoza capilară). Viteza lichidului este liniar proporțională cu câmpul electric aplicat. De asemenea, depinde de materialul utilizat pentru a construi canalul și soluția utilizată. În interfață, soluția și materialul au obținut încărcături opuse și, acesta este cunoscut ca un strat dublu electric. Când se aplică un câmp electric la soluție, stratul electric dublu se deplasează cu forța Coulomb rezultată. Acesta este cunoscut ca fluxul electro-osmotic.
Care este diferența dintre electroforeză și osmoză electrozică? • În electroforeză, particule solide (macromolecule ca acizii nucleici sau proteine) sunt mutate folosind un câmp electric. Dar în electro-osmoză se mișcă un lichid. • În electroforeză, materialul suport solid este un gel. Dar electro-osmoza poate fi un gel, o membrana, un capilar etc.. |