Diferența între HPLC și LCMS

Diferența cheie - HPLC vs. LCMS
 

Să analizăm mai întâi semnificația HPLC și LCMS înainte de a analiza diferența dintre HPLC și LCMS. Cromatografia este o tehnică de separare în analiza chimică în care componentele eșantionului sunt separate în timpul trecerii printr-un mediu cromatografic. De asemenea, implică interacțiunea cu proba, faza staționară și faza mobilă. HPLC înseamnă Cromatografie lichidă de înaltă performanță, și este folosit ca metodă de cromatografie lichidă în chimia analitică. Combinația dintre Lichid de cromatografie și spectroscopie de masă (LCMS) a fost dezvoltat pentru analiza cantitativă a biomoleculelor selectate și este o procedură de testare extrem de sensibilă, precisă și specifică în comparație cu HPLC. Acesta este diferența principală dintre HPLC și LCMC. Acest articol vă va prezenta metodele HPLC și LCMC care se ocupă de analizele chimice și vor discuta diferențele dintre HPLC și LCMS.

Ce este HPLC?

Cromatografia lichidă de înaltă performanță (HPLC) este populară tehnica de separare în chimia analitică. Este în principal utilizate pentru a separa componentele, pentru a identifica și pentru a cuantifica fiecare component într-un amestec. Anterior, această metodă era cunoscută sub numele de cromatografie lichidă la presiune înaltă deoarece depinde de pompe să curgă un solvent lichid sub presiune cuprinzând amestecul de probă printr-o coloană ambalată cu un material adsorbant solid. Fiecare constituent din amestecul de probă interacționează diferit cu materialul adsorbant solid, ceea ce are ca rezultat rate diferite de curgere pentru diferiți constituenți. Aceasta poate conduce la separarea constituenților în cursul coloanei HPLC.

HPLC a fost folosit pentru diferite aplicații precum analiza nivelurilor de vitamina D din sânge, consumul de droguri ilegale de sportivi prin detectarea reziduurilor de medicamente în urină, sortarea componentelor unui eșantion biologic complex pentru scopuri de cercetare și analiză și fabricarea de produse farmaceutice.

Ce este LCMS?

Cromatografia lichidă-spectrometrie de masă (LCMS) este o tehnică analitică care combină abilitățile fizice de separare a cromatografiei lichide cu capacitățile de analiză de masă ale spectrometriei de masă (MS). Cromatografia lichidă este o tehnică de separare, iar spectrometria de masă este utilizată pentru a analiza raportul masă-încărcare a particulelor încărcate. Separarea fizică este de obicei realizată prin HPLC și, alternativ, LCMS cunoscută și ca HPLC-MS. LCMS este a tehnica analitică dominantă care are a precizie foarte mare, sensibilitate și specificitate comparativ cu HPLC. Astfel, este util în multe aplicații, cum ar fi scopuri de cercetare, analiză de droguri, analiză alimentară etc. LCMS este în principal folosit pentru a separa, detecta, identifica și cuantifica proprietățile biochimice a unei probe particulare în prezența unor amestecuri chimice complexe.

Care e diferenta dintre HPLC și LCMC?

Acronimul și definiția HPLC și LCMC

HPLC: HPLC reprezintă cromatografia lichidelor de înaltă performanță. Este o tehnică de separare care este folosită în principal pentru a separa componentele, pentru a identifica și a cuantifica fiecare component într-un amestec.

LCMS: LCMS înseamnăCromatografie lichidă și spectrometrie de masă. Este o tehnică analitică care combină abilitățile fizice de separare a cromatografiei lichide cu capacitățile de analiză în masă ale spectrometriei de masă (MS).

Caracteristicile HPLC și LCMC

Clasificare

HPLC: Aceasta este doar o metodă de cromatografie lichidă.

LCMS: Aceasta este o combinație între metoda cromatografiei lichide și metoda spectrometriei de masă.

Eficienţă

HPLC: Comparativ cu LCMS, analiza HPLC este mai puțin eficientă și mai lentă.

LCMS: Comparativ cu HPLC, analiza LCMS este eficientă și mai rapidă.

Sensibilitate

HPLC: Comparativ cu LCMS, analiza HPLC este mai puțin sensibilă.

LCMS: Comparativ cu HPLC, analiza LCMS este mai sensibilă.

Specificitate

HPLC: Comparativ cu LCMS, analiza HPLC este mai puțin specifică.

LCMS: Comparativ cu HPLC, analiza LCMS este mai specifică.

Precizie

HPLC: HPLC oferă rezultate mai puțin precise decât LCMS pentru determinarea unor substanțe chimice.

LCMS: LCMS oferă rezultate mai precise decât HPLC pentru determinarea unor substanțe chimice.

component

HPLC: HPLC poate fi considerată ca o componentă a LCMS.

LCMS: LCMS nu poate fi considerat ca o componentă a HPLC.

Ion Sursă

HPLC: Sursa de ioni nu există în instrumentul HPLC.

LCMS: Sursa de ioni este prezentă în instrumentul LCMS.

Aplicații

HPLC: Ioni, polimeri, molecule organice și biomolecule pot fi analizate utilizând HPLC.

LCMS: Moleculele organice și biomoleculele pot fi analizate. În contrast cu HPLC, LCMS poate fi utilizat pentru a examina amestecuri incomplet rezolvate.

operație

HPLC: Diagrama unui instrument HPLC este dată în figura 1 și include de obicei un autosampler, pompe și un detector. Aparatorul de prelevare introduce amestecul de probă în faza mobilă (amestec presurizat de solvenți, cum ar fi apă, acetonitril și / sau metanol), care îl transferă în coloană. Pompele livrează fluxul dorit și compoziția fazei mobile prin coloană. Coloana este umplută cu adsorbantul, care este o particulă solidă granulară, cum ar fi silice sau polimeri. Detectorul produce un semnal proporțional cu cantitatea de prezență a constituenților probelor în coloană, permițând astfel analiza cuantificabilă a constituenților probelor selectați. Instrumentul HPLC este controlat, iar analiza datelor este asigurată de un microprocesor digital și de un software de utilizator.

Figura 1: Diagrama instrumentului HPLC

LCMS: Diagrama instrumentului LCMS este prezentată în figura 2. Extractul de eșantion este introdus în coloana constând din HPLC. Această coloană păstrează metaboliții probați pe baza caracterelor fizice și diferiți metaboliți curg spre spectrometrul de masă la intervale diferite de timp. Spectroscopia de masă este utilizată pentru evaluarea masei de particule, pentru determinarea aranjamentului elementar al unei molecule și pentru clarificarea structurilor moleculare. Cu toate acestea, eșantionul trebuie ionizat pentru a genera molecule încărcate pentru a determina raporturile lor de masă-încărcare. Prin urmare, în locul instrumentelor HPLC, LCMS constă din trei module suplimentare, cum ar fi sursa de fier, un analizor de masă și un detector. O sursă de ioni poate transforma proba de fază gazoasă în ioni și un analizor de masă care grupează ionii de către masele lor folosind câmpuri electromagnetice. În cele din urmă, un detector cuantifică valorile și furnizează datele fiecărui ion prezent în eșantion. Tehnica LCMS poate fi utilizată atât pentru aplicații calitative cât și cantitative.

  Figura 2: Diagrama instrumentului LCMS

În concluzie, HPLC este o metodă de cromatografie lichidă, în timp ce LCMS este o combinație de cromatografie lichidă și spectrometrie de masă. Ambele tehnici de analiză au caracteristici diferite, dar pot fi utilizate pentru identificarea și cuantificarea compozițiilor alimentare, a produselor farmaceutice și a altor molecule bioactive.

Referințe Arpino, P. (1992). Spectrometria de masă cu cromatografie în lichid combinată. Partea a III-a. Aplicații ale termosprayului. Spectrometrie de masă, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. și Spoendlin, C. (2004). Aspectele practice ale cromatografiei lichide de înaltă performanță cu fază inversată cu fază inversă, utilizând coloane cu coloane de particule de 3 μm și coloane monolitice în dezvoltarea și producția farmaceutică care funcționează în conformitate cu bunele practici de fabricație actuale. Jurnalul de cromatografie, 1036 (2): 127-133. Lee, M.S. și Kerns, E.H. (1999). Aplicații LC / MS în dezvoltarea de medicamente. Spectrometrie de masă, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Desorbția / ionizarea laserului asistată de matrice la separarea lichidelor. Spectrometrie de masă 16 (5): 283. Amabilitatea imaginii: "Hplc" de către încărcătorul original a fost Kjaergaard la en.wikipedia - Transferat de la en.wikipedia. (Domeniu public) prin intermediul Commons