Diferența cheie dintre HPLC și HPTLC este aceea HPLC permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă, în timp ce HPTLC nu permite separarea cantitativă a componentelor într-o probă.
Cromatografia este o metodă de separare fizică care se utilizează pentru a separa și identifica componentele într-un amestec. Atât HPLC, cât și HPTLC sunt tehnici cromatografice. HPLC este cromatografie lichidă de înaltă performanță. HPTLC este o cromatografie în strat subțire de înaltă performanță.
1. Prezentare generală și diferență cheie
2. Ce este HPLC
3. Ce este HPTLC
4. Comparație comparativă - HPLC vs. HPTLC în formă tabulară
5. rezumat
HPLC este cromatografie lichidă de înaltă performanță. Este o tehnică analitică utilizată pentru separarea, identificarea și cuantificarea componentelor într-un amestec. În această tehnică, proba este dizolvată într-un solvent adecvat. Apoi, solventul cu probă este trecut printr-o pompă cu o presiune dată. Pompa este umplută cu material de adsorbant solid. Apoi, unele componente se leagă puternic la materialul absorbant, în timp ce alte componente se leagă slab. Acest lucru determină ca componentele să aibă debite diferite prin pompă. Prin urmare, componentele pot fi separate ușor.
Figura 01: Un sistem HPLC
Materialul adsorbant care umple pompa este cunoscut sub numele de faza stationara. Solventul cu probă dizolvată este cunoscut ca faza mobilă. Pompa utilizată în această tehnică se numește coloană. Coloana este umplută cu un material adsorbant, cel mai frecvent particule de silice. Dimensiunea acestor particule poate varia de la 2-50 pm. Procesul de separare este afectat de compoziția fazei mobile și de temperatura sistemului. Interacțiunile dintre faza staționară și componenta din probă pot fi interacțiuni hidrofobe, interacțiuni dipol-dipol, legături ionice etc..
Presiunea de funcționare a HPLC este considerabil mai mare decât cea a cromatografiei lichide tradiționale. Se află în jur de 50-350 de bar. Diferența dintre cromatografia lichidă și HPLC este că, în cromatografia lichidă, proba scade prin coloană sub gravitate, în timp ce în HPLC proba este presurizată prin coloană. Dimensiunea coloanei și a particulelor absorbante sunt, de asemenea, foarte mici în comparație cu cromatografia lichidă tradițională. Cu toate acestea, rezoluția dată de tehnica HPLC este superioară.
HPTLC este cromatografie în strat subțire de înaltă performanță. Este forma avansata si automata a traditionalului TLC. Această tehnică oferă o rezoluție eficientă într-o perioadă scurtă de timp. În această metodă de analiză, eșantionul și o referință pot fi analizate în același timp, ceea ce permite ca eșantionul să fie comparat cu referința. Oferă o precizie analitică îmbunătățită față de alte tehnici cromatografice. Timpul necesar analizei este mai mic. Tehnica este o tehnică cu costuri reduse.
Figura 02: O analiză a coloranților alimentari utilizând HPTLC
Metoda HPTLC este un proces simplu, iar etapa de preparare a probei este de asemenea eliminată (în TLC tradițional, etapa de preparare a probei este inclusă înainte de separare. Această etapă implică curățarea și îmbogățirea). Solventul poate fi utilizat direct fără nici un tratament prealabil, deși alte tehnici cromatografice necesită pre-tratamente cum ar fi degazare, filtrare etc..
Materialul adsorbant utilizat în HPTLC este dioxid de siliciu cu dimensiuni foarte mici ale particulelor. În TLC tradiționale, dimensiunea particulelor de silice este de 5-20 pm, în timp ce în HPTLC este de 4-8 pm. Proba este aplicată pe placa HPTLC folosind un aplicator. Oferă o aplicare uniformă și sigură. Apoi, plăcile sunt plasate într-o cameră având faza mobilă. Camera trebuie saturată cu vaporii fazei mobile. După procesul HPTLC, spoturile care s-au mutat pot fi detectate. Când se detectează petele de pe placă, tehnica HPTLC utilizează o regiune UV adecvată sau o cameră de iod.
HPLC față de HPTLC | |
HPLC este cromatografie lichidă de înaltă performanță. | HPTLC este o cromatografie în strat subțire de înaltă performanță. |
Tehnică | |
În HPLC, faza mobilă cu solventul este trecut printr-o coloană umplută cu faza staționară. | În HPTLC, eșantionul este păstrat pe o placă TLC și este plasat în interiorul unei camere care conține faza mobilă; apoi eșantionul este lăsat să migreze în sus placa împreună cu faza mobilă. |
Măsurare | |
În HPLC, diferențele dintre debitele componentelor prin coloană sunt utilizate pentru a separa componentele din eșantion. | În HPTLC, diferențele dintre distanțele parcurse de fiecare componentă din eșantion se utilizează pentru a separa componentele din eșantion. |
Separarea cantitativă | |
HPLC permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă. | HPTLC nu permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă. |
HPLC și HPTLC sunt două tehnici cromatografice. Diferența cheie între HPLC și HPTLC este că HPLC permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă, în timp ce HPTLC nu permite separarea cantitativă a componentelor într-un eșantion.
1. "Cromatografia lichidelor de înaltă performanță" Wikipedia, Fundația Wikimedia, 10 aprilie 2018, Disponibil aici.
2. "HPTLC." LinkedIn SlideShare, 30 mai 2011, Disponibil aici.
1. "HPTLCplatetoMS" de Kjaergaard în engleză Wikipedia - Transferat de la en.wikipedia la Commons (Public Domain) prin Commons Wikimedia
2. "Hplc" de către PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockAssociat Profesor (Privatdozentin) Universitatea din HohenheimInstitutul de Chimie Alimentară - G. Morlock, C.Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) via Commons Wikimedia