Bacteriile sunt microorganisme foarte mici. Ele sunt transparente, iar detectarea lor este dificilă în condiții vii și necontrolate. Astfel, diferite metode de colorare sunt dezvoltate pentru a facilita detectarea bacteriilor. Există trei tipuri majore de tehnici de colorare: colorare simplă, colorare diferențială și colorare structurală. Colorarea diferențială este o tehnică care utilizează mai mult de o pată pentru a diferenția bacteriile. Gram-ul și petele acide-rapide sunt cele mai cunoscute sub denumirea de pete diferențiale. Gramația Gram este o tehnică de colorare diferențială, care separă bacteriile în două grupuri cunoscute ca bacterii Gram-pozitive și bacterii Gram-negative. Pata accelerată rapidă este o pată diferențiată utilizată pentru a identifica organisme acide rapide, cum ar fi Mycobacterium, din organisme rapide non-acide. Aceasta este diferența principală dintre pata Gram și pata Acid Fast.
1. Prezentare generală și diferență cheie
2. Ce este Gram Stain
3. Ce este acidul rapid
4. Asemănări între colorarea gramului și acidul rapid
5. Comparație comparație comparativă - Pulbere gram vs acid rapid în formă tabulară
6. rezumat
Gram-ul Gram este o tehnică importantă de colorare diferențială utilizată pentru identificarea bacteriilor în microbiologie. Această tehnică a fost introdusă de bacteriologul danez Hans Christian Gram în 1884. Colorarea Gram clasifică bacteriile în două grupuri majore numite gram pozitive și gram negative, care sunt foarte importante în clasificarea și identificarea bacteriilor. Microbiologii efectuează colorarea în gram ca prim pas în caracterizarea bacteriană în timpul studiilor.
Bacteriile sunt grupate pe baza diferențelor dintre peretele celular. Gram pozitiv este compus dintr-un strat gros de peptidoglican în peretele lor celular, în timp ce bacteriile gram negative sunt compuse dintr-un strat peptidoglican subțire în peretele lor celular. Rezultatul colorării gram va fi bazat pe diferența de grosime a stratului peptidoglican al peretelui celular.
Gramațiile de grame se efectuează folosind patru reactivi diferiți, și anume; pata primara, mordant, agent de decolorare si contra-pata. Cristalul violet și safranina sunt utilizate ca pete primare și counter, în timp ce grame de iod și 95% alcool sunt utilizate ca mordant și decolourizer, respectiv. Pașii de bază ai gramei sunt după cum urmează;
La sfârșitul pătării gram, bacteriile gram negative vor fi observate în culoarea roz în timp ce grame de bacterii pozitive vor fi observate în culoarea purpurie.
Figura 01: bacterii gram negative și gram pozitive
Rezultatul colorării gramei este determinat de grosimea stratului peptidoglican din peretele celular. În timpul fazei de decolorare, petele primare și mordantul sunt îndepărtate cu ușurință de bacteriile gram-negative și devin incolore, deoarece au un strat peptidoglican subțire. Pata primară este reținută în bacteriile gram pozitive deoarece acestea au un strat peptidoglican gros. Contraparetele nu vor fi eficiente pentru bacteriile gram pozitive datorate retenției petei primare. Astfel, bacteriile pozitive din grame vor fi vizibile în culoarea primară a colorantului, adică culoarea purpurie. Contra-pata va pata bacteriile gram negative si vor fi vizibile in culoarea pick, care este culoarea safraninei. Prin urmare, este ușor să clasificați bacteriile în două grupe prin pată gram și este valoroasă în diferențierea și identificarea bacteriilor.
Rezistența la acid este o proprietate fizică a anumitor bacterii, în special rezistența lor la decolorarea prin acizi în timpul procedurilor de colorare. Odată colorate, aceste organisme rezistă procedurilor de decolorare pe bază de acid diluat sau etanol, comune în multe protocoale de colorare. Astfel, denumirea "acid rapid" este dată acelor organisme. Această proprietate este prezentată datorită faptului că are un nivel ridicat de material ceros (acizi mecolici) în pereții lor celulari. Acest test este esențial pentru identificarea Mycobacterium tuberculosis.
Figura 2: Mycobacterii rapide acide
Această pată rapidă acidă a fost dezvoltată de Paul Ehrlich în 1882. Tehnica rapidă a acidului Ehrlich a fost modificată de Ziehl-Neelsen și este acum folosită mai frecvent. Procedura de colorare rapidă a acidului implică trei reactivi diferiți. Carbol fuschin este utilizat ca pete primar. Alcoolul acid este folosit ca agent de decolorare. Metanolul albastru este folosit ca contra-pată. Procedura de colorare se efectuează după cum urmează.
Gram Pigment vs Acid Rapid | |
Gramația Gram este o tehnică de colorare diferențială, care separă bacteriile în două grupuri de bacterii Gram-pozitive și bacterii Gram-negative. | Acidă Pată rapidă este o pată diferențială utilizată pentru a identifica organismele acide rapid de la organismele rapide nonacide. |
Grundul primar | |
Violul de cristal este pata primară frecvent utilizată în colorarea gram. | Carbol fuchsin este pata primara utilizata in acid rapid. |
Agent de decolorare | |
95% alcool este utilizat ca agent de decolorare în grame. | Alcoolul acid este utilizat ca agent de decolorare în acid rapid. |
Counter Stain | |
Gram pe bază de gram folosește safranin ca contra-pete. | Pata rapida acide foloseste albastru de metilen ca contra-pata. |
Observare | |
Gram negativ bacterii sunt observate în culoare pick și bacterii grame pozitive sunt observate în culoarea violet. | Acid Bacteriile rapide sunt observate în culoarea roșie și bacteriile neacide rapide sunt observate în culoarea albastră. |
Vizualizarea microorganismelor în stare vie este dificilă. Prin urmare, petele biologice și procedurile de colorare sunt utilizate în mod extensiv pentru a studia proprietățile lor. Colorarea diferențială este un tip de tehnică de colorare folosită pentru a diferenția bacteriile. Pictura Gram și pată rapidă acidă sunt două tehnici de colorare diferențială. Gram-ul Gram diferențiază bacteriile gram negative și bacteriile gram pozitive pe baza grosimii pereților lor celulari. Acidul de colorare rapidă diferențiază bacteriile acide rapide de bacterii neacide rapide pe baza conținutului de acid micolic din peretele celular. Aceasta este diferența dintre acidul rapid și gramul de pete.
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți utiliza în scopuri offline conform notei de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența între Gram Stain and Acid Fast.
1. Aryal, Sagar. Acid-Fast Stain - principiu, procedură, interpretare și exemple. "Note on-line Microbiologie. N.p., 08 mai 2017. Web. Disponibil aici. 20 iulie 2017.
2. Pete diferențiate pentru identificarea bacteriilor: Gram, Acid-Fast & Endospore. N.p., n.d. Web. Disponibil aici. 20 iulie 2017.
1. "Nodul limfatic - infecția micobacteriană atipică (MAI) - pete AFB" de Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) prin intermediul Flickr
2. "Pata Gram 01" Prin dosarul lui Y Tambe-Y Tambe (CC BY-SA 3.0) prin intermediul Commons Wikimedia