Diferența dintre electroforeza capilară și electroforeza gelului
Share
Diferența de bază - Electroforeza capilară și electroforeza gelului
Electroforeza este o tehnică care se utilizează pentru a separa biomolecule pe baza încărcării particulelor, dimensiunii particulelor și formei particulelor. Migrarea moleculei, cunoscută sub numele de electrophoretic mobilitate, depinde de tipul de polimer / gel utilizat, dimensiunea porilor, tensiunea furnizată, timpul de funcționare și raportul dintre suprafață și volum. Există diferite tipuri de tehnici de electroforeză bazate pe tipul de biomolecule utilizate. Primul tip de electroforeză inventat a fost electroforeza pe hârtie în care hârtia nitroceluloză a fost utilizată ca mediu pentru separarea biomoleculelor. Principiul electroforezei în gel, în care diferite geluri cu dimensiuni de pori au fost utilizate pentru separarea biomoleculelor, a fost inventat mai târziu. Tehnica de electroforeză a gelului a fost modificată în continuare pentru a îmbunătăți acuratețea tehnicii, și o astfel de modificare este electroforeza capilară. Diferența cheie între electroforeza capilară și electroforeza pe gel este aceea gel electrophoresis se efectuează într-un plan vertical sau orizontal folosind un gel polimeric cu dimensiunea standard a porilor, în timp ce electrophoresa capilară se realizează într-un tub capilar cu un lichid polimeric sau un gel.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferență cheie
2. Ce este electroforeza gelului
3. Ce este electroforeza capilară
4. Asemănări între electroforeza capilară și electroforeza gelului
5. Comparație comparați între ele - Electroforeza capilară și electroforeza gelului sub formă de tablă
6. rezumat
Ce este electroforeza gelului?
Gel electrophoresis este o tehnică utilizată pentru a separa în principal acizii nucleici, proteine sau aminoacizi pe baza încărcăturii, dimensiunii și formei. Această tehnică folosește un gel fizic, care este o substanță polimerică, ca mediu de separare. Cele mai frecvent utilizate geluri sunt Agaroza (pentru separarea acidului nucleic) și Polyacrylamide (pentru separarea proteinelor). Aparatul pentru electroforeză pe gel conține tava de turnare a gelului pentru prepararea gelului, piepteni pentru turnarea fântânilor, rezervor tampon, electrozi - pozitiv (anod) și negativ (catod) și unitatea de alimentare cu tensiune. Molecule precum ADN sau ARN, care sunt încărcate negativ, se deplasează de la catod la anod și moleculele care sunt încărcate pozitiv se deplasează invers. Prepararea gelului se face în conformitate cu cerința. Dacă este necesară o rezoluție înaltă sau o separare a moleculelor, trebuie pregătit un gel cu concentrație ridicată, cu o dimensiune a porilor mai mici. Moleculele separate pe matricea de gel sunt observate după o tehnică de colorare. Moleculele separate apar ca benzi pe matricea de gel.
Figura 01: Electroforeza gelului
Gelul electrophoresis este utilizat în diagnosticul molecular, cum ar fi amprentarea ADN-ului pentru a determina prezența unui fragment specific de ADN / ARN sau a unei proteine. Gelul determină, de asemenea, puritatea probei biomolecule extrase. Gelul electrophoresis este efectuat ca o etapă preliminară pentru in și hibridizare și ca o analiză de confirmare după secvențiere.
Ce este electroforeza capilară?
Electroforeza capilară este o modificare a electroforezei pe gel care folosește același principiu de separare bazat pe sarcina, mărimea moleculei, dar se realizează într-un tub capilar cu o substanță gel sau un polimer lichid. Capilarele sunt preparate din silice topită și fiecare tub capilar are un diametru interior de 50-100 μm și are o lungime de 25-100 cm. Probele sunt injectate în tubul capilar care conține materialul polimeric și se separă mult mai rapid decât electroforeza convențională pe gel. Sistemul capilar este bine protejat în interiorul unei jachete izolatoare care protejează eșantionul de orice contaminare. Capilarele pot fi umplute cu polimeri lichizi cum ar fi hidroxietil celuloza sau geluri de înaltă rezoluție, cum ar fi poliacrilamida. Electroforeza capilară oferă o rezoluție mai mare; prin urmare, separarea este mai precisă. Electroforeza capilară utilizează un sistem automat de detecție prin analiză spectrofotometrică. Acest lucru se datorează raportului dintre suprafața superioară și volumul ridicat.
Figura 02: Electroforeza capilară
Electroforeza capilară este utilizată în situații precum criminalistica, unde este necesară o precizie mai mare și nu este folosită în mod obișnuit, deoarece este o tehnică costisitoare.
Care sunt asemănările dintre electroforeza capilară și electroforeza gelului?
- Separarea moleculelor în ambele tehnici se bazează pe sarcina și mărimea moleculei.
- Ambele tehnici pot fi utilizate pentru a separa atât acizii nucleici cât și proteinele.
- Volumul eșantionului celor două tehnici este același.
- Ambele tehnici folosesc un tampon pentru a facilita separarea.
Care este diferența dintre electroforeza capilară și electroforeza gelului?
Electroforeza capilară vs electroforeza gelului | |
| Electroforeza capilară este o tehnică care separă biomoleculele de un tub capilar utilizând un mediu polimer lichid sau gel. | Gel electrophoresis este o tehnică care separă biomoleculele pe un plan vertical sau orizontal, folosind un mediu gel polimer. |
| Separare | |
| În electroforeza capilară, separarea se face în interiorul unui tub capilar. | În electroforeza pe gel, separarea se face pe un plan vertical sau orizontal. |
| Mediu de separare | |
| Polimerii lichizi precum hidroxietilceluloza sunt utilizați în electroforeza capilară. | Gelurile, fie agaroză sau poliacrilamidă, sunt utilizate ca mediu în electroforeză pe gel. |
| Legătura încrucișată | |
| Rezoluția înaltă poate fi obținută prin electroforeză capilară. | Rezoluția este redusă în cazul electroforezei pe gel. |
| Suprafață de suprafață față de raportul volum | |
| Raportul dintre suprafață și volum este ridicat în electroforeza capilară. | Raportul dintre suprafață și volum este scăzut în electroforeza pe gel. |
| Tehnica de detectare | |
| Detectarea se face prin detectoare automate spectrofotometrice în electroforeză capilară. | Colorarea și observarea prin transiluminator UV se fac ca tehnici de detecție în electroforeză în gel. |
Rezumat - Electroforeza capilară și electroforeza gelului
Diagnosticarea moleculară joacă un rol major în lumea științifică. Identificarea și purificarea ADN-ului, ARN-ului și a proteinelor reprezintă etape critice în procedurile de diagnosticare. Electroforeza este o tehnică care separă și identifică biomolecule atât în electroforeza pe gel, cât și în electroforeza gelului capilar avansat. Electroforeza gelului se efectuează într-un plan vertical sau orizontal folosind un gel polimeric cu dimensiunea standard a porilor, în timp ce electroforeza capilară este efectuată într-un tub capilar cu un lichid polimeric sau un gel. Aceasta este diferența dintre electroforeza capilară și electroforeza în gel. După terminarea tehnicii de electroforeză, biomoleculele sunt prelucrate în continuare pentru a obține informații de nivel superior prin hibridizare sau prin tehnici precum amprentarea.
Descărcați versiunea PDF a electroforezei capilare și electroforeza gelului
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți utiliza în scopuri offline conform notei de citare. Descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre electroforeza gelului și electroforeza capilară.
Referințe:
1. Durney, Brandon C. și colab. "Electroforeza capilară aplicată ADN-ului: determinarea și valorificarea secvenței și structurii pentru avansarea bioanalizelor (2009-2014)". Chimia analitică și bioanalitică, Springer Berlin Heidelberg, 2015, Disponibil aici. Accesat 28 august 2017.
2. "Electroforeza" Universitatea din Leicester, 8 ianuarie 2009, Disponibil aici. Accesat 28 august 2017.
3. "Electroforeza gelului" Academia Khan, Disponibil aici. Accesat 28 august 2017.
Datorită fotografiei:
1. "Electroforeza pe gel de agaroză a ADN" de către Scoala de Resurse Naturale din Ann Arbor - laborator de ADN (CC BY 2.0) prin intermediul Commons Wikimedia
2. "Schema instrumentului de electroforeză a gelului capilar" de Chem4066sp13 - Lucrare proprie (CC BY-SA 3.0) prin intermediul Commons Wikimedia
