Diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia

Diferența cheie - hibridizare în situ în funcție de imunohistochimie
 

Diagnosticarea bolilor și a bolilor infecțioase este o tendință populară în care se folosesc noi tehnici de proteomică și genomică în scopul identificării tumorilor sau a celulelor infecțioase, a proliferării și a locurilor de dezvoltare a celulelor și analiza bazei genetice a majorității bolilor transmisibile și non-transmisibile. Acest lucru va duce la o prelucrare și proiectare precisă a medicamentelor și la dezvoltarea de terapii personalizate pentru boli. Hibridizarea in situ (ISH) și imunohistochimia (IHC) sunt două astfel de tehnici utilizate pe scară largă în biologia cancerului, iar diferența-cheie dintre hibridizarea in situ și imunochimie constă în moleculele care sunt utilizate în procedura de analiză. În ISH, probele de acid nucleic sunt utilizate în analiză, în timp ce în IHC se utilizează anticorpi monoclonali și policlonali pentru determinările de diagnosticare.

CUPRINS

1. Prezentare generală și diferență cheie
2. Ce este hibridizarea in situ
3. Ce este imunohistochimia
4. Asemănări între hibridizarea in situ și imunohistochimia
5. Comparație comparativă comparativă - hibridizare in situ vs. imunohistochimie în formă tabulară
6. rezumat

Ce este hibridizarea in situ (ISH)?

Hibridizarea in situ este o tehnică de hibridizare a acidului nucleic care este efectuată direct pe o porțiune sau pe o secțiune a țesutului, în întregul țesut sau în celule. Tehnica depinde de teoria combinării bazei complementare Watson Crick, rezultând fie hibrizi ADN-ADN sau hibrizi ADN-ARN care pot detecta gene mutate sau pot identifica gena necesară de interes. Secvențele de ADN cu catenă dublă, secvențe de ADN dublu catenar, secvențe de ARN monocatenare sau secvențe oligonucleotidice sintetice sunt utilizate ca probe în timpul tehnicii de hibridizare și aceste probe sunt marcate cu un fosfor radioactiv la capătul 5 'pentru proceduri de identificare după autoradiografie sau marcate folosind coloranți fluorescenți . Există diferite tipuri de tehnici ISH disponibile pe baza tipului de sondă utilizat și a tipului de tehnică de vizualizare urmată.

Figura 01: Hibridizarea in situ a fluorescenței

Există multe aplicații ale ISH, în principal în diagnosticarea moleculară a bolilor infecțioase, în scopul identificării prezenței agenților patogeni și confirmării patogenului prin diagnosticarea moleculară. Este, de asemenea, utilizat în domeniile biologiei dezvoltării, cariotipării și analizei filogenetice și al cartografierii fizice a cromozomilor.

Ce este imunohistochimia (IHC)?

În tehnica IHC, molecula principală analizată este antigenul. În timpul IHC, anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru a determina prezența antigenilor la infecție sau la proliferarea celulelor maligne. Tehnica se bazează pe legarea antigen-anticorp, iar pentru această tehnică se utilizează etichete enzimatice; o astfel de aplicație este testul ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). Markerii pot fi de asemenea anticorpi marcați fluorescenți sau anticorpi marcați radio.

Figura 02: Imunohistochimie

IHC este utilizat pe scară largă pentru detectarea celulelor canceroase. Procedurile de diagnostic vizează antigenele prezente pe celulele tumorale pentru identificarea și caracterizarea tumorii. Aceeași procedură este incorporată pentru diagnosticarea agenților infecțioși. Anticorpii monoclonali și policlonali sunt, de asemenea, utilizați pentru a analiza diferite produse genetice, permițând reacția de legare a anticorpului-antigen între proteina dorită și anticorpul sintetic administrat.

Care sunt asemănările dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia?

• ISH și IHC sunt reacții foarte specifice.
• Ambele tehnici sunt foarte precise.
• Ambele tehnici pot fi folosite în diagnosticarea cancerului și a bolilor infecțioase.
• Aceste tehnici sunt realizate în medii sterile in vitro.
• Ambele sunt tehnici rapide care oferă rezultate reproductibile.
• ISH și IHC utilizează metode de detectare, cum ar fi etichetarea radio și tehnicile de fluorescență.

Care este diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia?

In situ hibridizare vs. imunohistochimie
ISH este o tehnică de hibridizare a acidului nucleic, care este efectuată direct pe o porțiune sau pe o secțiune a țesutului sau pe întregul țesut.	IHC este o tehnică în care anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru a determina prezența antigenilor care sunt markeri specifici ai proteinei plasați pe suprafețele celulare.
Tipul de molecule bio analizate
ISH analizează acizii nucleici.	IHC analizează proteinele-antigene.
Bazele reacției biochimice
Combinarea complementară de bază între DNA-ADN sau ADN-ARN apare în această tehnică.	Intervențiile antigen-anticorp sunt implicate în imunohistochimie.
Metode de detecție legate de enzime
Metodele de detecție legate de enzimă nu pot fi utilizate în ISH.	Metodele de detecție legate de enzimă pot fi utilizate în IHC.

Rezumat - Hibridizare in situ vs imunohistochimie

Diagnosticarea moleculară este o metodă rapidă și de confirmare care poate fi utilizată pentru a identifica o boală ne-transmisibilă, cum ar fi cancerul sau boala transmisibilă, cum ar fi HIV sau tuberculoza, pe baza markerilor moleculari prezenți în celule care duc la manifestarea bolii. Markerii moleculari pot fi prezenți sub formă de proteine ​​exprimate sau la nivel genetic, pe baza cărora sunt introduse diferite tehnici noi pentru a spori eficiența și sunt mai puțin laborioase, deși există un cost ridicat asociat acestor tehnici. Astfel, ISH depinde de formarea hibrid ADN-ADN sau ADN-ARN, iar IHC depinde de reacțiile specifice dintre anticorp și antigen. Aceasta este diferența dintre hibridizarea in situ.

Descărcați versiunea PDF a hibridării in situ în funcție de imunohistochimie

Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți utiliza în scopuri offline conform notei de citare. Descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia.

Referințe:

1. Duraiyan, Jeyapradha și colab. "Aplicații ale imunohistochimiei", Jurnalul de Științe ale Farmaciei și Bioalimentare, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, august 2012, Disponibil aici. Accesat 24 august 2017.
2. "Hibridizarea in situ" (ISH). "Centrul Național de Informații Biotehnologii, Biblioteca Națională de Medicină din S.U.A., Disponibil aici. Accesat 24 august 2017.

Datorită fotografiei:

1. "FISH (Fluorescent In Situ Hybridization)" de MrMatze - Muncă proprie (CC BY-SA 3.0) prin intermediul Commons Wikimedia
2. "Imunohistochemicalstaining2" De Imoen la limba engleza Wikipedia (CC BY-SA 3.0) prin intermediul Commons Wikimedia