Diferența dintre transfecția tranzitorie și stabilă

Diferența cheie - transfecție tranzitorie vs. stabilă
 

Transfecția este un proces care este implicat în transferul de gene al celulelor eucariote folosind metode chimice sau fizice. Transfecția poate fi clasificată în principalele două tipuri numite transfecție tranzitorie și transfecție stabilă. În timpul transfecției tranzitorii, gena de interes nu reușește să se integreze cu genomul gazdei și este exprimată temporal în gazdă pe termen scurt, în timp ce în transfecție stabilă, gena de interes se integrează cu genomul gazdei și este susținută pe termen lung în mai multe generațiis. Aceasta este diferența cheie între transfecția tranzitorie și cea stabilă. În ambele cazuri, transfecția are succes și se exprimă genele.

CUPRINS
1. Prezentare generală și diferență cheie
2. Ce este transfecția tranzitorie
3. Ce este transfecția stabilă
4. Comparație comparați între ele - transfecție tranzitorie vs. stabilă
5. rezumat

Ce este transfecția tranzitorie?

Transfecția este un instrument important pentru introducerea genelor în celulele eucariote. Dintre cele două tipuri de transfecție, transfecția tranzitorie este un mod comun în transferul de gene. Prin intermediul unui vector, genele străine sunt transformate în interiorul celulelor gazdă. Odată ce ADN străin intră în celula gazdă, are două opțiuni. Se poate integra fie cu genomul gazdă și replica, fie rămâne înăuntru fără a se integra în genom. Transfecția transientă prezintă expresia temporară a genelor inserate fără integrarea în genomul gazdei. Genele exprimă și produc proteina codificată până când celula se împarte. Cu toate acestea, din cauza incapacității de integrare, nu se poate replica și nu poate intra în generațiile viitoare. Acest tip de transfecție are succes pentru o perioadă scurtă de timp. În timpul diviziunii celulare sau datorită unor alți factori, ADN străin este supus la degradare. Transfecția transientă este prezentată atunci când ADN-ul străin este sub formă de ADN foarte înfășurat.

Figura 01: Transfecția tranzitorie

Ce este transfecția stabilă?

Transfecția stabilă prezintă integrarea genei străine de succes în genomul gazdei. Odată ce ADN străin intră în interiorul celulei gazdă, o parte a ADN-ului străin se integrează cu genomul gazdei și devine o parte a acestuia. Prin urmare, ADN-ul străin replică și trece în generațiile viitoare când genomul gazdă replică. Acest tip de transfecție este complex și rar. Cu toate acestea, datorită transfecției stabile în genom, această trăsătură este susținută pentru o perioadă mai lungă de mai multe generații.

Transfecția stabilă este un proces dificil și necesită o livrare eficientă a ADN-ului și achiziționarea de celule a ADN-ului străin în genomul său. Prin urmare, ADN-ul liniar favorizează transfecția stabilă decât ADN-ul circular. Cu toate acestea, rata de transfecție stabilă este de aproximativ unul din zece⁴ celulele transformate. Transfecția stabilă poate fi observată prin cotransfomarea unui marker selectabil și efectuarea selecției artificiale pe un mediu.

Figura 02: Transfecție stabilă

Care este diferența dintre transfecția tranzitorie și stabilă??

Transfecție tranzitorie vs stabilă
ADN-ul străin nu se integrează într-un genom gazdă.	ADN-ul strain se integreaza cu genomul gazda si devine o parte din acesta.
Replicarea în cadrul gazdei
Genele transfectate tranzitoriu nu se replică în gazdă. Prin urmare, genele nu sunt transmise generațiilor viitoare.	Genele sunt replicate în cadrul gazdei și transmise generațiilor viitoare.
Durata de timp a expresiei genetice
Genele sunt exprimate pentru o perioadă finită și după aceea sunt distruse.	Genele devin parte a genomului și se exprimă în cadrul generației pentru o perioadă lungă de timp.
Utilizare
Acest lucru este util pentru studierea efectelor expresiei pe termen scurt a genelor sau a produselor genetice.	Acest lucru este util pentru studierea efectelor expresiilor genetice pe termen lung.
Detectarea transfecției
Genele sunt exprimate și pot fi ușor detectate prin inserarea unei gene reporter.	Transfecția stabilă poate fi ușor detectată prin introducerea unui marker selectabil și selectarea prin selecție artificială pe suporturi media.
Apariție și proces
Transfecția transientă este obișnuită și nu este complexă de efectuat.	Transfecția stabilă este rară la apariție și este complexă pentru a fi efectuată.
Natura ADN-ului
ADN-ul foarte supersolicitat este potrivit pentru transfecția tranzitorie.	ADN-ul liniar este potrivit pentru transfecție stabilă.
Aplicații
Acest lucru este folosit pentru studiile de knockdown gena sau tăcere cu ARN-uri inhibitoare, producția de proteine ​​la scară mică	Acest lucru este utilizat pentru producerea de proteine ​​pe o scară largă, studii de farmacologie pe termen lung, terapie genică, cercetare privind mecanismele de reglementare genetică pe termen lung

Rezumat - Transfecție tranzitorie vs. stabilă

Transfecțiile tranzitorii și stabile sunt două tipuri de transfecții prezentate în timpul transferării genei în celule eucariote prin sisteme non-virale. ADN-ul străin transformat nu este integrat cu genomul gazdă în transfecția tranzitorie în timp ce se integrează cu genomul gazdă în transfecție stabilă. Anticorpul spiralat circular este prezentat prin transfecție tranzitorie, în timp ce ADN-ul liniar preferă transfecția stabilă. Aceasta este diferența dintre transfecția tranzitorie și cea stabilă. Transfecția tranzitorie este mai frecventă și mai ușoară comparativ cu transfecția stabilă. Alegerea uneia dintre cele două depinde de scopul transferului de gene și de durata proiectului de cercetare.

Referințe:
1. Condreay, J. Patrick, Sam M. Witherspoon, William C. Clay și Thomas A. Kost. "Expresie genetica tranzitorie si stabila in celulele mamifere transduse cu un vector de baculovirus recombinant", Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Academia Națională de Științe, 05 ianuarie 1999. Web. 25 martie 2017
2. Kim, Tae Kyung și James H. Eberwine. "Transfecția celulară de mamifere: prezentul și viitorul". Chimia analitică și bioanalitică. Springer-Verlag, august 2010. Web. 25 martie 2017