Diferența dintre faza inversă și faza normală HPLC

diferența cheie între faza inversă și cea cu fază normală HPLC este aceea că HPLC cu fază inversă utilizează o fază staționară polară și o fază mobilă mai puțin polară, în timp ce HPLC cu fază normală utilizează o fază staționară nepolară și o fază mobilă polară.

HPLC cu fază normală este cea mai veche tehnică de HPLC utilizată de Tswett în separările sale de extracte de plante; el folosea creta într-o coloană de sticlă. Acesta a fost modul clasic de cromatografie care a condus la denumirea lui ca tehnica "normală". Faza HPLC cu fază inversă, pe de altă parte, este opusul tehnicii normale, pe care oamenii de știință s-au dezvoltat în ultima vreme.

CUPRINS

1. Prezentare generală și diferență cheie
2. Ce este HPLC în fază inversă
3. Ce este HPLC cu fază normală
4. Comparație comparați între ele - faza inversă față de HPLC cu fază normală în formă tabulară
5. rezumat

Ce este HPLC în fază inversă?

HPLC în fază inversă este o tehnică cromatografică în care se utilizează o fază staționară hidrofobă. Dintre toate metodele HPLC, folosim această metodă pentru aproximativ 70% din cauza aplicabilității sale largi și a reproductibilității. Faza staționară este nonpolară, iar faza mobilă este polară.

De cele mai multe ori, oamenii de știință folosesc un amestec apos de apă cu un solvent organic miscibil, polar, cum ar fi acetonitrilul sau metanolul ca fază mobilă. De aceea, analizele interacționează cu faza staționară nepolară.

Ce este HPLC cu fază normală?

HPLC cu fază normală este o tehnică cromatografică în care utilizăm o fază staționară hidrofilă. Este metoda tradițională de HPLC, deși nu o folosim atât de mult. Faza staționară este polară, iar faza mobilă este nepolară. Mai important, faza mobilă a acestei tehnici este 100% organică. Aceasta înseamnă că nu este folosită nici o apă pentru acest lucru.

Figura 01: Un profil de probă pentru cromatogramele HPLC cu fază normală și cu fază inversă în funcție de polaritatea componentelor din analizat.

În mod obișnuit, faza staționară conține faze mobile de silice, cian, diol, amino, etc. Fazele mobile includ solvenți organici cum ar fi hexan, acetat de etil etc. Această tehnică se bazează pe reținerea moleculelor de solvenți sau de analit pe faza staționară polară.

Care este diferența dintre faza inversă și cea cu fază normală HPLC?

HPLC în fază inversă este o tehnică cromatografică în care se utilizează o fază staționară hidrofobă. Faza staționară a acestei tehnici este nepolară. Faza staționară este nepolară, în timp ce faza mobilă este polară. Mai mult, oamenii de știință utilizează un amestec apos de apă cu un solvent organic miscibil, polar, cum ar fi acetonitrilul sau metanolul ca fază mobilă în HPLC cu fază inversă. Întrucât HPLC cu fază normală este o tehnică cromatografică în care utilizăm o fază staționară hidrofilă. Faza staționară a acestei tehnici este polară. Faza staționară este polară, în timp ce faza mobilă este nepolară. În plus, cercetătorii folosesc solvenți organici, cum ar fi hexan, acetat de etil etc., ca fază mobilă a HPLC cu fază normală. Infografia de mai jos prezintă diferența dintre faza inversă și cea cu fază normală HPLC într-o formă tabelară.

Rezumat - Faza inversă față de faza normală HPLC

Tehnicile cu fază reversă și cu fază obișnuită HPLC sunt două tehnici de cromatografie lichidă. Diferența dintre HPLC în fază inversă și fază normală este că HPLC cu fază inversă utilizează o fază staționară polară și o fază mobilă mai puțin polară, în timp ce HPLC cu fază normală utilizează o fază staționară nepolară și o fază mobilă polară.

Referinţă:

1. Ape. "Moduri de separare HPLC" HPLC - Cromatografie lichidă de înaltă performanță Explained: Waters. Disponibil aici  
2. "cromatografie lichidă de fază normală pentru separarea izomerilor și a compușilor care sunt instabili în mediu apos". Normal_Phase_LC. Disponibil aici