Diferența dintre imunofluorescența directă și cea indirectă
Share
diferența cheie între imunofluorescența directă și indirectă este faptul că imunofluorescența directă utilizează un singur anticorp care acționează împotriva țintei de interes, în timp ce imunofluorescența indirectă utilizează doi anticorpi pentru a eticheta țintă de interes.
Imunofluorescența sau imagistica celulară este o tehnică care se utilizează pentru a marca un antigen țintă specific cu un fluorofor. Aici, fluoroforul este un compus chimic fluorescent care poate emite lumină din cauza excitației luminoase. Când un fluorofor se leagă cu antigenul țintă, acesta permite detectarea moleculei țintă din probă. Pentru ao descrie mai departe, atunci când un antigen se leagă cu un anticorp specific, acesta poate fi conjugat cu fluorofori. Prin urmare, este ușor să se detecteze prezența antigenului țintă în probă atunci când se observă sub microscop fluorescent.
În plus, există două tipuri de imunofluorescență; imunofluorescență directă și indirectă. Diferența dintre imunofluorescența directă și cea indirectă constă, în principal, în numărul de anticorpi utilizați și al conjugării cu fluorofor. Adică, în imunofluorescență directă, fluoroforul direct conjugat cu anticorpul primar în timp ce se află în imunofluorescență indirectă, conjugatul cu fluorofor cu anticorpul secundar.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferență cheie
2. Ce este imunofluorescența directă?
3. Ce este imunofluorescența indirectă
4. Asemănări între imunofluorescența directă și cea indirectă
5. Comparație comparativă - Imunofluorescență directă vs. indirectă în formă tampon
6. rezumat
Ce este imunofluorescența directă??
Imunofluorescența utilizează anticorpi pentru detectarea antigenelor țintă specifice. Imunofluorescența directă este unul dintre cele două tipuri de imunofluorescență. În imunofluorescența directă, un singur anticorp (anticorp primar) implică și fluoroforul direct conjugat cu anticorpul primar. După legarea anticorpului cu antigenul țintă, fluoroforul emite fluorescență care poate fi detectată printr-un microscop fluorescent.
Figura 01: Imunofluorescența directă
Cu toate acestea, imunofluorescența directă este o metodă costisitoare deoarece anticorpii primari conjugați sunt costisitori comparativ cu anticorpii secundari. Cu toate acestea, nu implică un pas suplimentar, prin urmare, o tehnică mai scurtă. Mai mult, legăturile nespecifice sunt reduse în imunofluorescența directă. Prin urmare, reactivitatea încrucișată a speciilor este scăzută. Dar, în detectare, sensibilitatea imunofluorescenței directe este slabă în comparație cu imunofluorescența indirectă .
Ce este imunofluorescența indirectă?
Imunofluorescența indirectă este al doilea tip de imunofluorescență care implică două tipuri de anticorpi cum ar fi anticorpi primari și secundari în etichetarea antigenului țintă. În această metodă, fluoroforul conjugă cu anticorpul secundar. Prin urmare, această tehnică implică un pas suplimentar.
Figura 02: Imunofluorescența
Cu toate acestea, sensibilitatea este ridicată în această metodă deoarece mai multe fluorofori pot fi conjugați la anticorpii secundari și face detectarea mai ușoară. Mai mult, imunofluorescența indirectă este mai puțin costisitoare datorită faptului că conjugarea anticorpilor secundari este mai puțin costisitoare și mai ușoară. În comparație cu imunofluorescența directă, reactivitatea încrucișată a speciilor este ridicată în metoda indirectă.
Care sunt asemănările dintre imunofluorescența directă și cea indirectă?
- Acestea sunt două tipuri de tehnici de imunofluorescență.
- Anticorpii primari și fluoroforul implică ambele metode.
- De asemenea, reacția antigen-anticorp are loc în ambele metode.
- Mai mult, imunofluorescența directă și indirectă utilizează un microscop fluorescent pentru detectarea antigenului.
Care este diferența dintre imunofluorescența directă și cea indirectă?
Imunofluorescența poate fi directă sau indirectă pe baza conjugării cu fluorofor cu anticorpii utilizați. În imunofluorescența directă, fluoroforul conjugă cu anticorpul primar, care este anticorpul unic care implică această tehnică. Spre deosebire de aceasta, în imunofluorescența indirectă, fluoroforul conjugă cu anticorpul secundar, care este unul dintre cele două tipuri de anticorpi care implică în tehnică. Prin urmare, diferența principală dintre imunofluorescența directă și indirectă este tipul de anticorp care conjugă cu fluoroforul.
Următoarele informații infografice oferă o comparație între părți a diferenței dintre imunofluorescența directă și cea indirectă.
Rezumat - Imunofluorescența directă vs. indirectă
Imunofluorescența este o tehnică care se utilizează pentru a detecta prezența antigenilor specifici într-o probă. Această tehnică utilizează anticorpi specifici. Prin urmare, în acest caz, anticorpii se conjugă cu fluorofori pentru a le detecta utilizând un microscop fluorescent. Mai mult, există două tipuri de imunofluorescență și anume imunofluorescența directă și indirectă. Imunofluorescența directă implică un singur anticorp și fluorofor direct conjugat cu acest anticorp. Imunofluorescența indirectă implică doi anticorpi; primar și secundar și fluorofor conjugat cu anticorpul secundar. Deoarece mai mulți anticorpi secundari se pot lega cu un anticorp primar și mai multe fluorofori pot conjuga cu anticorpi secundari, imunofluorescența indirectă este o metodă mai sensibilă decât metoda directă. Mai mult, metoda indirectă este mai puțin costisitoare decât metoda directă. Astfel, aceasta este diferența dintre imunofluorescența directă și cea indirectă.
Referinţă:
1. "Imunofluorescență" Wikipedia, Fundația Wikimedia, 19 august 2018. Disponibil aici
Datorită fotografiei:
1. "HSP IF IgA" de Emmanuelm la en.wikipedia, (CC BY 3.0) prin intermediul Commons Wikimedia
2. "Imunofluorescență" de Westhayl618 - Lucrare proprie, (CC BY-SA 4.0) prin intermediul Commons Wikimedia
